超高效液相色譜儀是基于高效液相色譜法的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測手段等全新技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。主要用于各種藥物及其制劑的分析測定，尤其是生物樣品、中藥等復(fù)雜體系的成分的分離分析，可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析。超高效液相色譜儀的速度、靈敏度及分離度分別是傳統(tǒng)的高效液相色譜儀的9倍、3倍及1.7倍，它縮短了分析時(shí)間，同時(shí)減少了溶劑用量降低了分析成本。
目前，超高效液相色譜儀是應(yīng)用超高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。
超高效液相色譜儀主要優(yōu)點(diǎn)：
1.單一波長標(biāo)準(zhǔn)靈敏度、高靈敏度吸收譜。
2.自動(dòng)測定D2燈及W燈的開啟次數(shù)、燈狀態(tài)、燈點(diǎn)燃時(shí)間、燈能量、設(shè)定D2燈及W燈狀態(tài)。
3.針對(duì)復(fù)雜混合物中各化合物在不同波長下的響應(yīng)差異，用時(shí)間程序切換波長進(jìn)行分析，與傳統(tǒng)紫外-可見檢測器相比，能夠極大程度提高所有化合物的測定靈敏度。
4.超高效液相色譜儀采用進(jìn)口光電二極管陣列作為光電檢測元件，無需任何機(jī)械部分調(diào)整、選擇和改變波長，儀器使用過程中不會(huì)引起波長的改變，與常規(guī)的單色儀相比有良好的波長準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性，使得分析結(jié)果更加可靠。
超高效液相色譜儀的操作步驟：
1.過濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜（0.45um）。
2.對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.打開HPLC工作站，連接好流動(dòng)相管道，連接檢測系統(tǒng)。
4.進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5.有一段時(shí)間沒用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過10ml/min。
6.調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。
7.設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取select users and methods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊new method。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：
①進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；
②基線歸零；
③進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；
④走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。
8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。
9.關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。
